Định lượng trực tiếp các protein từ quang phổ kế (phương pháp UV)
Phương pháp này là để kiểm tra protein trực tiếp ở bước sóng 280 nm. Chọn công thức Warburg, quang kế có thể trực tiếp hiển thị nồng độ mẫu, hoặc chọn phương pháp chuyển đổi thích hợp để chuyển đổi giá trị độ hấp thụ thành nồng độ mẫu. Quá trình xác định protein rất đơn giản. Kiểm tra mẫu trắng trước và sau đó kiểm tra trực tiếp protein. Do sự có mặt của một số tạp chất trong bộ đệm, thông tin “nền” ở 320 nm thường bị loại bỏ và chức năng này được đặt thành “ON”. Tương tự như axit nucleic thử nghiệm, giá trị độ hấp thụ của A280 được yêu cầu phải lớn hơn 0,1 A và phạm vi tuyến tính tối ưu nằm trong khoảng từ 1,0-1,5. Khi công thức Warburg được sử dụng để hiển thị nồng độ mẫu trong thử nghiệm, đọc được tìm thấy là "trôi". Đây là một hiện tượng bình thường. Trong thực tế, miễn là quan sát giá trị hấp thụ của A280 không vượt quá 1%, kết quả là rất ổn định. Lý do cho sự trôi dạt là giá trị độ hấp thụ của công thức Warburg được chuyển đổi thành nồng độ và nhân với một yếu tố nhất định. Miễn là có một chút thay đổi về giá trị độ hấp thụ, nồng độ sẽ được khuếch đại và kết quả sẽ rất không ổn định. Các phương pháp định lượng protein trực tiếp phù hợp để thử nghiệm các protein tương đối đơn thuần, tương đối đơn. Định lượng trực tiếp UV nhanh hơn và dễ thực hiện hơn so với đo màu; tuy nhiên, nó dễ bị nhiễu do các chất song song, chẳng hạn như nhiễu DNA và độ nhạy thấp đòi hỏi nồng độ protein cao.
Công ty chuyên bán máy quang phổ , chào đón khách hàng có nhu cầu tư vấn và mua hàng, chúng tôi sẽ cung cấp cho bạn dịch vụ chân thành và chất lượng sản phẩm, cũng như giá thấp hơn.
E-mail: info@sumerlab.com
Web: sumerinstrument.com